实验编号

102#（高中生物，必修1）

实验名称

检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质

实验原理

某些化学试剂能够使生物组织中的有机化合物产生特定的颜色反应。糖类中的还原性糖（如葡萄糖、果糖）可以与斐林试剂发生作用，产生砖红色沉淀；蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应；脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色也可以被苏丹Ⅳ染液染成红色；淀粉遇碘液变蓝色。

      因此，可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应，检测生物组织中糖类、脂肪或蛋白质的存在。

目的要求

1．举例说出一些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。

2．尝试用化学试剂检测几种生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的存在。

实验材料

苹果或梨匀浆，花生种子，鸡蛋清，马铃薯匀浆。

标准样液

苹果或梨匀浆，马铃薯匀浆，花生种子（实验前浸泡3～4 h）及其匀浆，鸡蛋清（稀释10倍后使用），鲜肝提取液，质量分数为1%的葡萄糖溶液，食用油，豆浆，质量分数为1%的淀粉溶液。

实验仪器

双面刀片、试管（最好用刻度试管）、

大小烧杯、小量筒、滴管、

酒精灯、三脚架、石棉网、温度计、

载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸、显微镜

双面刀片，毛笔，培养皿，载玻片，盖玻片，显微镜，吸水纸，滴管，试管，试管架，试管夹，大、小烧杯，小量筒，三脚架，石棉网，火柴。

实验试剂

（1）斐林试剂甲液：质量浓度为0．1 g/mL的NaOH溶液。

乙液：质量浓度为0．05 g/mL的CuSO4溶液。

（2）苏丹Ⅲ染液称取0．1 g苏丹Ⅲ干粉，溶于100 mL体积分数为95%的酒精溶液中，待全部溶解后使用。

苏丹Ⅳ染液称取0．1 g苏丹Ⅳ干粉，溶于50 mL丙酮中，再加入体积分数为70%的酒精溶液50 mL，充分混合后即可使用。

（3）双缩脲试剂A液：质量浓度为0．1 g/mL的NaOH溶液（10 g NaOH加水至100 mL）。B液：质量浓度为0．01 g/mL的CuSO4溶液（1 g CuSO4加水至100 mL）。

（4）此外还有碘液，体积分数为50%的酒精溶液，蒸馏水。

苏丹Ⅲ染液        50%的酒精 

双缩脲试剂A液（NaOH溶液）1ml            双缩脲试剂B液（CuSO4溶液）4滴

方法步骤

（3）还原糖的检测和观察

①向试管内注入2 mL待测组织样液。

②向试管内注入1 mL斐林试剂（甲乙液等量混合均匀后再注入）。

③将试管放入盛有50～65 ℃温水的大烧杯中加热约2 min。

④观察实验现象。如果待测组织样液中还原糖含量较高，可见溶液的变化为：浅蓝色→绿色→棕黄色→砖红色沉淀。

（4）脂肪的检测和观察（一）

向待测组织样液中滴加3滴苏丹Ⅲ染液，观察不同生物组织样液被染色的情况。

（5）脂肪的检测和观察（二）

制作花生子叶临时切片，用显微镜观察子叶细胞的着色情况。

①取材取一粒浸泡过的花生种子，去掉种皮。

②切片用刀片在花生子叶的横断面上平行切下若干薄片，放入盛有清水的培养皿中待用。

③制片

选材：从培养皿中选取最薄的切片，用毛笔蘸取放在载玻片中央。

染色：在花生子叶薄片上滴2～3滴苏丹Ⅲ染液，染色3 min（如果用苏丹Ⅳ染液，染色1 min）。

清洗：用吸水纸吸去染液，再滴加1～2滴体积分数为50%的酒精溶液，洗去浮色。

盖片：用吸水纸吸去薄片周围的酒精，滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片。

④观察在低倍镜下寻找花生子叶薄片的最薄处，移到视野中央，将影像调节清楚后换高倍镜观察。在视野中可以清晰地看到被染成橘黄色的脂肪颗粒。

（6）蛋白质的检测和观察

①向试管内注入待测组织样液2 mL。

②向试管内注入双缩脲试剂A液1 mL,摇匀；再注入双缩脲试剂B液4滴,摇匀。

③观察实验现象。如果待测组织样液中蛋白质含量较高，可以观察到待测组织样液变成紫色。

（7）淀粉的检测和观察

①向试管内注入2 mL待测组织样液。

②向试管内滴加2滴碘液，观察颜色变化。

实验现象

实验1.试管中溶液形成砖红色沉淀

实验2.试管中溶液被染成红色.

实验3.试管中荣产生紫色反应.

实验结论

生物组织样液

化学试剂

特定颜色反应

证明某种化合物的存在

苹果

斐林试剂

砖红色

还原糖

花生种子

苏丹Ⅲ染液

橘黄色

脂肪

苏丹Ⅳ染液

红色

黄豆

双缩脲试剂

紫色

蛋白质

生物组织样液

化学试剂

特定颜色反应

证明某种化合物的存在

苹果

花生种子

黄豆